2月27日，東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院柴人杰教授團(tuán)隊(duì)聯(lián)合多家單位在Cell Press細(xì)胞出版社醫(yī)學(xué)旗艦刊Med，在線發(fā)表了題為“Precise and efficient DNA base editing restores normal hearing in adult DFNB9 mouse model”的研究論文。該研究篩選了一種DNA堿基編輯器Nme2ABE8e，能夠有效糾正致病性O(shè)tof突變c.2815C>T (p.Gln939*)。研究結(jié)果顯示，在2、3和4月齡小鼠中注射AAV也能改善聽力，表明治療窗口期較長(zhǎng)。對(duì)野生型（WT）小鼠進(jìn)行的全面安全性評(píng)估顯示，未檢測(cè)到耳毒性或神經(jīng)功能缺陷。該研究表明Nme2ABE8e治療DFNB9的安全性和有效性，并提示DFNB9患者可能具有相對(duì)較長(zhǎng)的基因治療治療窗口期。

東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院柴人杰教授、北京理工大學(xué)齊潔玉教授、東南大學(xué)賀祖宏教授為本文共同通訊作者。東南大學(xué)博士研究生張紫雨、王嫚，東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院談方志副研究員，東南大學(xué)博士后張李燕為共同第一作者。

聽力損失是最常見的感官障礙之一，影響著全球約15 億人。其中，約有4.3 億人（包括 3,400 萬兒童）患有致殘性聽力損失。基因突變導(dǎo)致的耳聾病例超過一半，其中常染色體隱性遺傳性聽力損失是最主要的遺傳類型，占遺傳性非綜合征型病例的80%。OTOF是已知的致聾基因之一，它編碼OTOF蛋白，該蛋白在聽覺毛細(xì)胞帶狀突觸的突觸小泡胞吐過程中起著關(guān)鍵作用。OTOF基因突變是先天性聽覺神經(jīng)病譜系障礙（Auditory Neuropathy Spectrum Disorder，ANSD）的主要病因。攜帶純合OTOF突變的患者通常表現(xiàn)為雙側(cè)重度聽力損失，且在語(yǔ)前發(fā)病。目前已知有超過200種OTOF突變可導(dǎo)致聽力損失。

由于DNA堿基編輯高特異性和潛在的持久性，其在遺傳性耳聾的治療中展現(xiàn)出良好的前景。近期研究表明，DNA堿基編輯具有恢復(fù)耳聾小鼠模型（包括攜帶Otof突變的小鼠）聽力功能的潛力。這些研究使用了斷奶前小鼠，時(shí)間跨度為出生后第0天至第21天（P0-P21），這一發(fā)育窗口期耳蝸的成熟與人類胚胎發(fā)育相對(duì)應(yīng)。小鼠在出生后開始發(fā)育聽力，聽力敏感性從P14到P21逐漸提高，而人類耳蝸在出生時(shí)即已完全成熟。這種發(fā)育差異限制了新生或斷奶前小鼠模型在評(píng)估聽覺干預(yù)措施方面的臨床應(yīng)用價(jià)值。

圖1：DNA堿基編輯治療策略示意圖

在該研究中，研究者篩選到一種堿基編輯器Nme2ABE8e，并在體外和體內(nèi)實(shí)現(xiàn)了對(duì)Otof突變c.2815C>T的精確編輯。該系統(tǒng)展現(xiàn)出高效的基因編輯效率和良好的安全性，在耳蝸內(nèi)毛細(xì)胞中實(shí)現(xiàn)了最高58.8%的cDNA水平校正，且脫靶效應(yīng)極小。AAV介導(dǎo)堿基編輯治療的成年小鼠（P30）聽力功能穩(wěn)定恢復(fù)，且至少在治療后持續(xù)6個(gè)月。值得注意的是，4月齡的小鼠接受治療后聽力也得到改善，表明治療窗口相對(duì)較長(zhǎng)。此外，安全性評(píng)估證實(shí)，Nme2ABE8e對(duì)聽覺、運(yùn)動(dòng)或記憶功能均無不良影響。因此，DNA堿基編輯是一種有前景的DFNB9治療策略，治療窗口可能相對(duì)較寬。（編輯 蔡逸秋 校對(duì) 劉敏 編審 程守勤）

原文鏈接：https://www.cell.com/med/fulltext/S2666-6340(26)00004-8