【寫在前面】：本期推薦的是由浙江中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示射干麻黃湯通過抑制CCL3介導(dǎo)的NETosis改善肺纖維化進(jìn)展。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

肺纖維化（PF）是一系列慢性肺部疾病，其特征為細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過度沉積、肌成纖維細(xì)胞異常增殖以及肺組織結(jié)構(gòu)過度重塑。盡管在理解PF的分子機(jī)制方面取得了重大進(jìn)展，但其發(fā)病機(jī)制仍不明確。已有一些藥物顯示出治療PF的療效，如吡非尼酮和尼達(dá)尼布，但這些藥物常見的副作用包括胃腸道反應(yīng)和肝損傷。因此，需要在PF的藥理學(xué)治療領(lǐng)域做出更多努力。

今天分享的這篇文章采用了“表型發(fā)現(xiàn)→多組學(xué)篩選→靶點(diǎn)驗(yàn)證→因果論證”的邏輯主線首次揭示射干麻黃湯（SGMH）的抗肺纖維化新用途。

【有效成分確認(rèn)】

化學(xué)成分與血清藥理學(xué)銜接。利用UPLC-MS/MS技術(shù)，不僅鑒定出SGMH中的435種成分，還鎖定了12種入血成分（如五味子酯甲、五味子乙素等）。雖然未深入挖掘具體哪個(gè)成分起效，但為后續(xù)尋找CCL3的直接化學(xué)抑制劑指明了方向，解決了中藥“成分復(fù)雜”的痛點(diǎn)。

【現(xiàn)象確認(rèn)】

SGMH是否有效？ 作者首先通過構(gòu)建博來霉素（BLM）誘導(dǎo)的小鼠PF模型對(duì)射干麻黃湯（SGMH）的治療作用進(jìn)行探討，發(fā)現(xiàn)SGMH劑量依賴性地減輕了肺組織損傷、膠原沉積和炎癥因子表達(dá)。由此，確認(rèn)SGMH的“有效”。

【上游機(jī)制篩查】

既然有效，是通過什么途徑起效的？ 作者利用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序（RNA-seq）和單細(xì)胞測(cè)序（scRNA-seq）進(jìn)行無偏好的全基因組篩查。轉(zhuǎn)錄組富集分析指向“免疫反應(yīng)”和“炎癥”；單細(xì)胞測(cè)序發(fā)現(xiàn)PF患者肺組織中“中性粒細(xì)胞”比例顯著增加。這提示SGMH可能作用于中性粒細(xì)胞相關(guān)的炎癥通路，因此，作者將重點(diǎn)分析這些DEG在中性粒細(xì)胞中的表達(dá)差異。

【表型鎖定】

中性粒細(xì)胞胞外陷阱（NETs）是由DNA、組蛋白和抗菌蛋白組成的胞外結(jié)構(gòu)，由中性粒細(xì)胞在應(yīng)對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等病原體時(shí)釋放。許多研究表明，NETs在多種呼吸系統(tǒng)疾病中發(fā)揮作用，包括慢性阻塞性肺疾病（COPD）、PF、急性肺損傷、細(xì)菌性肺炎和肺癌。抑制NETosis可保護(hù)小鼠免受病毒加重型COPD模型中的免疫病理損傷。NETs在呼吸系統(tǒng)疾病中具有重要作用，靶向NETs可能為PF治療提供新機(jī)會(huì)。

作者進(jìn)一步驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，SGMH顯著降低了血清和肺泡灌洗液中的NETs標(biāo)志物，明確SGMH阻止PF的發(fā)展的核心效應(yīng)是“抑制NETs形成”。

【必要性驗(yàn)證】

但SGMH起效是否“必須”通過抑制NETs？ 為了證明SGMH的療效確實(shí)依賴于抑制NETs，而非其他旁路，作者進(jìn)行了“藥效學(xué)疊加/阻斷”實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NETs的清除不能進(jìn)一步增強(qiáng)SGMH改善PF的效果，說明SGMH的療效幾乎完全依賴于“抑制NETs形成”，而非其他機(jī)制。

【靶點(diǎn)與因果驗(yàn)證】

那么SGMH通過哪個(gè)分子調(diào)控NETs？ 作者結(jié)合多組學(xué)數(shù)據(jù)，CCL3被確定為SGMH有前景的治療靶點(diǎn)。通過Rescue和Mimic實(shí)驗(yàn)，在給予SGMH的同時(shí)，補(bǔ)充重組CCL3（rCCL3），發(fā)現(xiàn)NETs形成恢復(fù)，SGMH的抗纖維化作用被逆轉(zhuǎn)；直接使用CCL3中和抗體（anti-CCL3），能模擬出SGMH的抗PF效果；但anti-CCL3 + SGMH聯(lián)合用藥沒有協(xié)同增效。最終得出結(jié)論：SGMH精準(zhǔn)靶向CCL3這一上游分子，通過下調(diào)CCL3來阻止NETosis，從而改善PF。

【結(jié)論與討論】

綜上，作者及其團(tuán)隊(duì)以射干麻黃湯為研究載體，借助多組學(xué)篩選，首次構(gòu)建了“SGMH→抑制CCL3分泌→阻斷中性粒細(xì)胞NETosis→減輕肺纖維化”的完整證據(jù)鏈，不僅為中醫(yī)“肺病”理論賦予了現(xiàn)代免疫學(xué)內(nèi)涵，也為臨床治療PF提供了一個(gè)有前景的候選藥物和（CCL3）新靶點(diǎn)。

注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！

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