上海
前期介紹 Merck 通過。作為 KRAS 抑制劑關(guān)鍵中間體，N-甲基脯氨醇衍生物（化合物1，CAS-90-3）含有兩個連續(xù)手性中心與極性氨基醇結(jié)構(gòu)，是決定藥物活性與成藥性的關(guān)鍵骨架。通過酶催化合成工藝，合成千克級、高立體選擇性的該化合物，解決原有合成工藝難題。
一鍋法酶促水解-脫羧-立體選擇性還原；
以CAL-B實現(xiàn)溫和中性水解避免差向異構(gòu)；
用Eschweiler-Clarke 反應(yīng)替代高危 LAH 還原甲基化。
?CAL-B（CAS #9001-62-1） 能在水相或有機相中催化酯水解、酯交換等反應(yīng)，具有高活性及立體選擇性。你是否進行過此類酶催化反應(yīng)，歡迎大家在評論區(qū)進行討論，分享你的合成故事。
具體合成操作請至文末查看
工藝路線與關(guān)鍵步驟
步驟 1：β-酮酯（6）合成
原料：以 反式-4-甲氧基-N-Boc-L-脯氨酸（2）為起始原料；
縮合：經(jīng)CDI 活化后與丙二酸單乙酯鉀鹽 / 氯化鎂一鍋縮合；
結(jié)果：控制溫度 < 50oC，無羰基 α-位差向異構(gòu)化。
步驟 2：一鍋酶促轉(zhuǎn)化（關(guān)鍵）
酶水解：使用CAL-B在中性水相溫和水解 β-酮酯（6），避免堿導致的差向異構(gòu)；
脫羧：升溫至 50oC自發(fā)脫羧生成酮（4），同時使 CAL-B 自然失活；
酶還原：酶KRED 2（Candida magnoliae）立體選擇性還原酮基，使用GDH + 葡萄糖實現(xiàn) NADPH 輔酶循環(huán)，降低成本；
結(jié)果：轉(zhuǎn)化率 88%、非對映純度 100%，一鍋法收率92.4%。
步驟 3-4：Boc 脫除與 N-甲基化
Boc 脫除：甲磺酸（MsOH）為最優(yōu)試劑，甲苯為溶劑，100% 轉(zhuǎn)化；
甲基化：使用Eschweiler-Clarke 反應(yīng)（甲醛+甲酸）替代 LAH 高危工藝；
結(jié)果：避免強酸條件生成惡唑烷副產(chǎn)物，通過中和后一鍋法實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)化。
步驟 5：L-酒石酸鹽成鹽純化
成鹽：粗品油狀物1 經(jīng) L-酒石酸（1.1 當量）在異丙醇中成鹽；
純化：60oC加熱后冷卻至 25oC結(jié)晶，無過量酒石酸析出；
結(jié)果：得到最終產(chǎn)物1·LTA，白色固體。
總合成路線
以1 kg 化合物 2為起始原料，合成1·LTA，總收率 65%。經(jīng)過三批次收率、純度、異構(gòu)體水平完全一致，證明該合成路線可工業(yè)化、連續(xù)生產(chǎn)。
原文具體合成步驟
上下滾動圖片
酶催化合集
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