類風濕關節炎（RA）是一種以持續性滑膜炎為核心特征的慢性自身免疫病，可導致關節進行性破壞、畸形與殘疾，全球約1%人群受累，構成重大疾病負擔。盡管靶向TNF、IL-6、CD20、JAK等通路的療法不斷問世，但仍有近40%患者對現有藥物應答不佳，5%–20%最終發展為對多種靶向治療均耐藥的難治性類風濕關節炎。滑膜成纖維細胞是炎癥滑膜中最主要的細胞組分，在耐藥RA患者中呈現顯著富集，驅動侵襲性血管翳形成、軟骨與骨破壞。然而，可用于臨床轉化的、靶向滑膜成纖維細胞的關鍵分子仍亟待發現。P2X7受體（P2X7R）是ATP激活的配體門控陽離子通道，在自身免疫病中被廣泛關注，但其在RA滑膜成纖維細胞中的精準表達、功能貢獻及治療價值尚未明確。

近日，北京大學人民醫院栗占國教授、孫曉麟教授聯合北京大學深圳醫院王慶文教授、北京大學基礎醫學院初明教授及浙江康恩貝制藥金慶平研究員團隊在期刊ScienceAdvances上發表題為P2X7R of synovial fibroblasts is a potential therapeutic target candidate associated with refractory rheumatoid arthritis的研究性論文，系統闡明P2X7R在難治性RA滑膜成纖維細胞中特異性高表達，并驅動侵襲、炎癥、增殖等致病表型。研究團隊利用臨床樣本、單細胞測序、原代細胞功能實驗及非人靈長類關節炎模型證實：高選擇性人源P2X7R抑制劑EVT-401可顯著抑制滑膜成纖維細胞異常活化、減輕關節炎癥與骨軟骨破壞。機制上，P2X7R通過Notch與細胞周期通路維持滑膜成纖維細胞致病狀態，且特異性富集于多藥耐藥CTAP-F亞型。該研究證實P2X7R是難治性RA的關鍵治療靶點，為突破多藥耐藥困境提供全新方向。

P2X7R在RA滑膜與滑膜成纖維細胞中顯著高表達

研究團隊收集RA與OA患者滑膜組織，通過免疫組化、Western blot、流式等方法證實：P2X7R在RA滑膜組織中表達顯著升高，并與滑膜炎分級、CRP水平正相關。并且RA滑膜成纖維細胞的P2X7R表達顯著高于OA成纖維細胞，而高滑膜炎樣本中P2X7R表達顯著高于低/無滑膜炎組。

單細胞測序證實：P2X7R富集于致病性lining亞群與難治性CTAP-F亞型

基于大樣本RA滑膜單細胞轉錄組數據，團隊發現：P2RX7主要富集于PRG4+ lining成纖維細胞（F-0、F-1），該亞群直接介導關節侵襲與破壞。P2RX7在CTAP-F（成纖維細胞主導型）中表達最高，而CTAP-F是公認的多藥耐藥亞型。

進一步通過臨床樣本驗證：治療應答差、高DAS28活動度患者的滑膜P2X7R顯著更高。

EVT-401：高選擇性人源P2X7R拮抗劑，強效抑制RA滑膜成纖維細胞的致病表型

EVT-401是一種高選擇性人源P2X7R小分子拮抗劑，可特異性結合并抑制人源P2X7R通道功能，對其他P2X家族受體無明顯交叉作用，保證了靶點作用的專一性。體外實驗結果系統證明，EVT-401能夠通過抑制P2X7R信號通路，對RA 滑膜成纖維細胞發揮多重調控作用：不僅可誘導細胞凋亡并引發G1期周期阻滯，從而有效抑制其異常增殖；還能顯著下調 IL-6、MMP-3、DKK-1 等關鍵炎癥因子與軟骨破壞介質的釋放；同時顯著抑制細胞的遷移與侵襲能力，從根源上阻斷血管翳形成、關節侵蝕與破壞的關鍵病理進程。

轉錄組機制：EVT-401抑制細胞周期、Notch與ECM重塑通路

RNA測序顯示：EVT-401顯著下調細胞周期、炎癥反應、ECM受體互作、Notch信號等與耐藥RA相關的核心通路，從轉錄水平逆轉滑膜成纖維細胞的致病表型。

非人靈長類模型驗證：EVT-401顯著緩解關節炎、保護關節結構

鑒于嚙齒類P2X7R與人差異大，團隊使用食蟹猴膠原誘導關節炎模型進行進一步研究發現：EVT-401顯著降低臨床關節炎評分、PIP關節腫脹率；影像學與組織學顯示骨侵蝕、軟骨破壞、滑膜增生、炎細胞浸潤均顯著減輕。而EVT-401對心、肝、脾、肺、腎無明顯病理損傷，安全性良好。

人源化模型驗證：EVT-401直接抑制人RA SF侵襲軟骨

團隊進一步構建人軟骨-RA SF共植入SCID小鼠模型，發現EVT-401顯著抑制人RA滑膜成纖維細胞向軟骨侵襲，并降低hP2X7R陽性細胞面積，直接證明藥物對人細胞的靶向療效。

本研究系統證實：P2X7R是難治性類風濕關節炎滑膜成纖維細胞的潛在驅動靶點；高選擇性抑制劑EVT-401可阻斷增殖、侵襲、炎癥，并在非人靈長類中顯示強效療效與良好安全性；P2X7R可作為生物標志物篩選最可能獲益的多藥耐藥患者。該研究完成從靶點發現→機制闡明→藥物驗證→臨床轉化的全鏈條，為難治性類風濕關節炎的治療提供全新策略。

文章第一作者為饒佩詩（北京大學人民醫院&復旦大學附屬中山醫院廈門醫院），金善釗（北京大學人民醫院），肖詩白（北京大學深圳醫院），馬銀超（北京大學基礎醫學院），李靜（北京大學人民醫院）。

原文鏈接：https://doi.org/10.1126/sciadv.adw9543

制版人：十一

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