剛接觸流式的大家,第一次做圈門都會(huì)被不同的門搞懵,小編當(dāng)年也是對(duì)著軟件熬了好幾個(gè)夜才搞懂。今天用這張手繪,把每道門的作用和順序講清楚,幫你少走彎路。
流式圈門的核心邏輯,就是層層過濾,從雜到純,這 5 道門缺一不可:
1. 散射門(FSC/SSC):
作用:去除碎片、雜質(zhì),圈出主細(xì)胞群;
關(guān)鍵:用多邊形門圈出目標(biāo)細(xì)胞群體,排除左下角碎片區(qū)
2. 單細(xì)胞門:
作用:排除黏連體,保證單細(xì)胞分析;
關(guān)鍵:圈出對(duì)角線的線性分布區(qū),偏離線的黏連體全部排除
3. 活 / 死門:
作用:去除死細(xì)胞,減少非特異性染色干擾
關(guān)鍵:圈出死活染料陰性的活細(xì)胞群,排除死細(xì)胞
4. 譜系門:
作用:根據(jù)表面抗原分亞群(T/B/ 單核等)
關(guān)鍵:用矩形 / 橢圓門圈出陽性細(xì)胞群,明確細(xì)胞身份
5. 功能門
作用:分析細(xì)胞功能狀態(tài)(凋亡 / 周期 / 增殖)
關(guān)鍵:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇對(duì)應(yīng)門型,如凋亡用四象限門、周期用直方圖門
? 圈門順序:散射門 → 單細(xì)胞門 → 活 / 死門 → 譜系門 、功能門 記住這個(gè)流程,再也不怕圈門出錯(cuò)!
編輯:冷漠小 z
內(nèi)容源自于:丁香大師姐
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